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人25-羟基维生素D(25
来源:365备用网址器 作者:36365.com 发布时间:2019-01-27 阅读次数:80
人体25-羟基维生素D(25 - OH - VD)的安全性1)避免直接接触终止溶液和底物A,B。
接触这些液体后,请尽快用清水冲洗。
2)在实验过程中不要使用饮食,吸烟或化妆品。
3)不要用嘴吸收试剂盒中的成分。
处理人体25 - 羟基维生素D(25 - OH - VD)的注意事项1)按照标签说明储存试剂,使用前恢复室温。
稀释的标准溶液必须丢弃,不能储存。
2)立即将未使用的药片放入包装袋中并密封以防止变质。
3)其他未使用的试剂应包裹或覆盖。
不要混合不同批次的试剂。
请在保修前使用。
4)使用一次性吸头以避免交叉污染。当提取终止溶液和基质A和B时,避免使用带有金属部件的移液器。
5)使用干净的塑料容器调整清洁溶液。
使用前,将所有材料和样品充分混合在试剂盒中。
6)洗涤酶板时,彻底干燥后,请勿将吸水纸直接放入酶的反应孔中。
7)基材A必须挥发,以防止盖子长时间打开。
基材B对光敏感并避免长时间暴露在光线下。
避免接触手并且有毒。
在完成实验后立即读取OD值。
8)试剂的添加顺序必须一致,以确保所有孔同时孵育。
9)培养操作按照说明书中所示的时间,加入的液体的量和顺序进行。
收集,处理和储存25-羟基维生素D(25-OH-VD)的人体样品的方法1)血清-----在手术期间避免细胞刺激。
请使用含有热原和内毒素的试管。
采血后,通过以1000×g离心10分钟快速且小心地分离血清和红细胞。
2)血浆----- EDTA,柠檬酸盐,血浆肝素可用于检测。
通过以1000×g离心30分钟除去沉淀。
3)细胞上清液:通过以1000×g离心10分钟除去颗粒和聚合物。
4)组织的均质化-----将组织加入适量的生理盐水中并粉碎。
5)储存------如果您不立即使用样品,请将其分成70°C以避免反复冻结。
请尽量不要使用溶血或高脂血症。
如果在进行测试之前血清中有大量颗粒,则离心或过滤。
不要在37°C以上加热熔化。
需要在室温下解冻并确认样品完全解冻。
人25-羟基维生素D试剂(25?OH?VD)的制备1)标准:必须在实验时制备标准系列稀释液,不能保存。
稀释前混合标准振荡器。
2)稀释洗涤缓冲液(50次):稀释50倍蒸馏水。
使用人25-羟基维生素D(25-OH-VD)的步骤1)在使用前充分混合所有试剂。
为避免在充电过程中添加大量气泡,请勿在液体中产生大量气泡。
2)根据要分析的样品数量和标准样品数量确定所需的条带数量。
对于标准孔和孔,建议使用多个孔。
每个样品根据其自身数量确定,并且可以尽可能使用双孔。
用样品稀释剂以1:1稀释样品,并将50μl加入到反应孔中。
3)向反应孔中加入50μl稀释的标准品,并将50μl待分析的样品加入到反应孔中。
立即加入50μl生物素化抗体。
盖上膜,轻轻摇动混合物,在37°C下孵育1小时。
4)从孔中取出液体,用洗涤液填充每个孔,摇动30秒,除去洗涤溶液并用吸水纸干燥。
重复此操作3次。
当用洗衣机洗涤时,洗涤次数增加1倍。5)每孔加入80μl亲和链霉抗生物素蛋白-HRP,通过摇动轻轻混合并在37℃下孵育30分钟。
6)从孔中取出液体,每个用洗涤液填充,摇动30秒,除去洗涤液并用吸水纸干燥。
重复此操作3次。
当用洗衣机洗涤时,洗涤次数增加1倍。
7)向每个孔中加入50μl每种底物A和B,通过摇动轻轻混合并在37℃下孵育10分钟。
避免照明。
8)取下微孔板,快速加入50μl终止液。添加停止解决方案后,您需要立即确定结果。
9)在450nm的波长下测量每个孔的OD值。
仅限于标准6的人25-羟基维生素D(25-OH-VD)的结果不是线性的,并且不能从该标准曲线获得准确的结果。
人体25-羟基维生素D试剂盒(25-OH-VD)的产量
灵敏度:最低检测浓度低于标准1号。
稀释线性
样品的线性回归和预期浓度相关系数R值为零。
990
2
特异性:它不与其他细胞因子反应。
3
再现性:板与板之间的变异系数小于10%。
人体25?羟基维生素D(25?OH?VD)的判断和分析1。设备值:读取酶标仪中450 nm波长的每个孔的OD值。2。吸光度是纵坐标(Y),待分析的相应标准品的浓度是横坐标(X),并且执行相应的曲线。可以根据校准曲线的OD值将待分析样品的含量转换成相应的浓度。